Skip to content

Wadliwa pokrzywka związana z wariantem bzdur w ADGRE2 cd..

1 miesiąc ago

547 words

Sekwencjonowanie Exome próbek DNA z rodziny ujawniło trzy warianty w obrębie przedziału sprzężenia, które spełniały kryteria filtrowania; Sekwencjonowanie Sangera wykazało, że jedno z nich było fałszywie dodatnim sygnałem, a jedno zostało sprawdzone jako prawdziwe wywołanie, ale było nieobecne u dotkniętych chorobą członków rodziny 2. Jedynym pozostałym wariantem kandydata było c.1475G . A w ADGRE2 (sekwencja referencyjna NCBI NM_013447. 3), co do którego przewidywano, że spowoduje substytucję missense p.C492Y (NP_038475.2). Położenie aminokwasu 492 znajduje się w obrębie motywu proteolitycznego białka G podjednostki ., 26 aminokwasów powyżej miejsca cięcia (Figura 2A). ADGRE2 znajduje się w haplotypie 1,7-Mb współdzielonym przez dotkniętych członków Rodziny i 2, a c.1475G . Wariant doskonale współgregowywany z fenotypem wibracyjnej pokrzywki u wszystkich 10 dostępnych członków Rodziny i wszystkich 25 dostępnych członków Rodziny 2 ; był także heterozygotyczny w jedynym dostępnym członie rodziny 3, probandzie. Wariant był nieobecny w wielu bazach danych (tabela S1 w dodatkowym dodatku), a także w 1105 nietkniętych libańskich i 100 nietkniętych izraelskich kontrolach. Żaden z 7 dotkniętych członków rodziny nie posiadał rzadkiego kodującego lub wariantu miejsca splicingowego w NLRP3 lub PLCG2, a geny te również zostały wykluczone przez analizę sprzężeń. W obrębie przedziału sprzężenia istniało 54 egzotypów kodujących białka, w których wszyscy 7 dotkniętych sekwencją egzemplifikacji uczestników z rodziny mieli co najmniej jedną pozycję nukleotydową o głębokości pokrycia mniejszej niż 20x. Przeprowadziliśmy sekwencjonowanie Sanger na tych eksonach w DNA od chorego uczestnika, ale nie znaleziono innych kandydujących wariantów, które pozostawiły p.C492Y w ADGRE2 jako jedyny rzadki, koendgregujący niesynonimiczny lub splicingowy wariant w znanych eksonach w przedziale kandydującym. Kodujące egzony ADGRE2 przeszukiwano za pomocą sekwencjonowania Sanger w panelu 60 pacjentów z różnymi sporadycznymi urticariami fizycznymi (tabela S2 w dodatkowym dodatku) i nie zidentyfikowano żadnych dodatkowych rzadkich wariantów kodujących lub splicingowych.
Wyrażenie ADGRE2
MRNA ADGRE2 ulegało ekspresji w wielu pierwotnych populacjach ludzkich komórek tucznych i linii komórek tucznych i było wszechobecnie wykrywalne w panelu ludzkich tkanek, chociaż jego ekspresja wydawała się być jakościowo wyższa w pierwotnych ludzkich komórkach tucznych i ludzkiej linii komórek tucznych LAD2 niż w innych tkankach. Ocena cytometrii przepływowej zarówno powierzchniowych, jak i całkowitych poziomów białka ADGRE2 wykazała silną ekspresję w wielu typach komórek tucznych (ryc. S3 w Dodatkowym dodatku).
Zależna od wibracji degranulacja komórek tucznych
Pierwotnym komórkom tucznym od dwóch pacjentów i jednej kontroli w rodzinie pozwolono przylegać do płytek, które następnie wibrowano na wytrząsarce orbitalnej, aby naśladować bodźce wywołujące objawy u pacjentów z pokrzywką wibracyjną. Komórki, które przylegały do podłoża polilizyny wykazywały minimalną degranulację w odpowiedzi na drgania. Jednakże, gdy były one przylegające do siarczanu dermatanu (endogennego liganda ADGRE2) lub do monoklonalnego przeciwciała anty-ADGRE2 2A1, komórki od pacjentów, ale nie od kontroli, wykazywały znaczący wzrost degranulacji w odpowiedzi na drgania. Ta odpowiedź była zależna od obecności wapnia w buforze podczas wibracji, co było zgodne z aktywacją wewnątrzkomórkowego mechanizmu sygnałowego (Figura 2B)
[hasła pokrewne: amyloza, kosmeceutyki, wdrożenia magento ]
[podobne: odleżyny na piętach, poradnia leczenia uzależnień warszawa, fosfolipazy ]

Powiązane tematy z artykułem: fosfolipazy odleżyny na piętach poradnia leczenia uzależnień warszawa