Skip to content

Wadliwa pokrzywka związana z wariantem bzdur w ADGRE2 cd 6

1 miesiąc ago

139 words

Dane są łączone z dwóch niezależnych eksperymentów. Nie ma mysiego ortologa dla ADGRE2, dlatego wykryto tylko transfekowany ludzki ADGRE2. Panele C i D pokazują pomiar konstytutywności (Panel C) i degranulację wywołaną przez drgania (Panel D). W celu pomiaru konstytucyjnej degranulacji, transfekowane komórki LAD2 inkubowano przez 5 godzin w celu umożliwienia ekspresji białka i badano komórki niezwibrowane. Aby zmierzyć degranulację wywołaną przez drgania, transfekowane komórki LAD2 inkubowano przez 5 godzin dla umożliwienia ekspresji białka i przylegały do płyt pokrytych siarczanem dermatanu przez 3 godziny; równoległe hodowle wibrowano przy 750 obrotach na minutę przez 20 minut lub nie wibrowano, a następnie badano. W panelach C i D dane są średnie i standardowe błędy dla czterech niezależnych eksperymentów, każdy wykonany w dwóch egzemplarzach (Panel C) lub potrójny (Panel D). Pojedyncza gwiazdka oznacza P <0,05, podwójną gwiazdkę P <0,01 i potrójną gwiazdkę P <0,001. W transfekowanych komórkach tucznych, które nie były poddawane wibracjom, zarówno podjednostki niezmutujące, jak i p.C492Y. Umiejscowione na błonie plazmatycznej z transbłonową podjednostką .. Po wibracjach podjednostka . p.C492Y została utracona z powierzchni komórki (Figura 3A), co spowodowało zmniejszoną kolokalizację podjednostek (Figura 3B). Ta dysocjacja sugeruje, że podstawienie p.C492Y destabilizuje oddziaływanie między podjednostkami . i ., tak, że naprężenie ścinające, które powstaje podczas wibracji, zakłóca ich niekowalencyjne przyłączenie.
Degranulacja konstytucyjna wywołana przez podjednostkę .
W niezwibrowanych transfekowanych komórkach LAD2, N-końcowy mutant skrócony eksprymujący tylko transbłonową podjednostkę . ADGRE2 wywołał większą konstytucyjną degranulację niż wszystkie klony pełnej długości (Figura 3C). Ta obserwacja jest zgodna z badaniami innych GPCR adhezji, które wykazały, że podjednostka ., sama w sobie, jest konstytutywnie aktywna17-19; sugeruje to, że pozakomórkowa podjednostka a hamuje sygnalizację przez podjednostkę ..
Odszczepieniec, degranulacja wywołana drganiami
W odpowiedzi na drgania, niezmutowany ADGRE2 indukował większą degranulację transfekowanych komórek LAD2 niż wektor kontrolny, a p.C492Y ADGRE2 indukował większą degranulację niż niezmutowane ADGRE2 (Figura 3D). Nie stwierdzono istotnych różnic między żadną z niewibrowanych populacji komórek (tabele S3 i S4 w dodatkowym dodatku). Dane te sugerują, że niezmutowany ADGRE2 jest nieco wrażliwy na wibracje i potwierdza hipotezę, że wariant p.C492Y jest hipermorficzny. Ani p.S518A, ani p. [C492Y; S518A] mutant z brakiem trawienia spowodował znacznie większą degranulację niż wektor kontrolny i p. [C492Y; Mutant S518A] nie indukował większej degranulacji niż mutant p.S518A; wskazuje to, że rozszczepienie jest wymagane w przypadku degranulacji indukowanej przez niezmutowane ADGRE2 lub p.C492Y ADGRE2. Wynik ten jest również zgodny z modelem, w którym wyzwalanie hamującej podjednostki . z transbłonowej podjednostki . jest odpowiedzialne za degranulację za pośrednictwem ADGRE2, ponieważ kowalencyjne przyłączenie podjednostek wyklucza odpowiedź. Wibracja 8 godzin po transfekcji nie wywoływała większej odpowiedzi od obciętego N ADGRE2 niż od innych klonów, prawdopodobnie dlatego, że konstytucyjna degranulacja tych komórek podczas inkubacji spowodowała zmniejszenie ich wydzielniczych granulek.
Dyskusja
Zidentyfikowaliśmy nowatorski wariant missense w ADGRE2 jako podstawę autosomalnej dominującej pokrzywki wibracyjnej, jednostki klinicznej i patofizjologicznej, która różni się od dermatografizmu i innych fizycznych wad urologii.
[podobne: nicorix, Nonacne, stomatolog opole ]
[przypisy: hipohondrija, leczenie w czechach na nfz, proteza szkieletowa bezklamrowa ]

Powiązane tematy z artykułem: hipohondrija leczenie w czechach na nfz proteza szkieletowa bezklamrowa