Skip to content

Wadliwa pokrzywka związana z wariantem bzdur w ADGRE2 cd 5

1 miesiąc ago

528 words

Nie było znaczących różnic między eksperymentami przeprowadzonymi z różnymi powłokami płytek, buforami lub próbkami komórek w procentach oderwanych komórek po wibracjach (dane nie przedstawione), więc brak degranulacji, gdy nie było wapnia, nie był wynikiem większej liczby komórek odłączenie od podłoża. W oddzielnym eksperymencie, komórki pacjenta z rodziny 2 wykazywały niewielką degranulację wywołaną przez drgania przy przyleganiu do polilizyny, ale degranulowały w większym stopniu, gdy ADGRE2 został zligowany poprzez adhezję do siarczanu dermatanu lub przeciwciała 2A1 (figura 2C). Ekspresja i przetwarzanie zmutowanego ADGRE2
Nie było widocznej różnicy między pacjentem a kontrolnymi pierwotnymi komórkami tucznymi w podstawowej ekspresji podjednostki . lub . ADGRE2, co sugerowało, że zmutowane białko ulega normalnej ekspresji. Ponieważ p.C492Y znajduje się w obrębie motywu miejsca proteolitycznego białka G, ocenialiśmy, czy podstawienie wpłynęło na cięcie ADGRE2. Komórki tuczne LAD2 skutecznie transfekowano albo wektorem kontrolnym albo jednym z pięciu konstruktów ekspresyjnych ADGRE2, z niewielkim wpływem na żywotność i z podobnymi poziomami ekspresji. Immunoblot wobec obu podjednostek ADGRE2 nie wykazywał różnicy między komórkami wyrażającymi niezmutowane ADGRE2 i tymi wyrażającymi p.C492Y ADGRE2 w obfitości białka pełnej długości, podjednostki . lub podjednostki .. Podobnie, oba transfektanty miały niższe poziomy pełnej długości białka i wyższe poziomy produktów cięcia, niż były obecne w pozbawionym trawienia p.S518A i p. [C492Y; S518A] mutanty. Co więcej, nie zaobserwowaliśmy zasadniczej różnicy między komórkami transfekowanymi niezmutowanym ADGRE2 i komórkami transfekowanymi p.C492Y ADGRE2 pod względem ich zdolności do przylegania do płytek pokrytych siarczanem dermatanu, ani nie obserwowaliśmy różnic między dowolnymi transfekowanymi komórkami w ADGRE2 przemytkującym do powierzchni komórki ( Rys.
Dezocjacja podjednostki wywołana wibracją
Figura 3. Figura 3. Degranulacja zależna od rozkładu wywoływana przez p.C492Y Zmutowana ADGRE2 związana z utratą powierzchni podjednostki ..Panel A pokazuje konfokalne mikrografie plasterków transfekowanych mastocytów pochodzących z mysiego szpiku kostnego. Jak wykryto przez immunobarwienie przeciwciałem 2A1 (czerwone), podjednostka a zmutowana p.C492Y a, ale nie niezmutowana podjednostka a, jest tracona z membrany plazmatycznej w odpowiedzi na drgania. W przeciwieństwie do tego, jak określono za pomocą wykrywania fluorescencyjnego GFP (zielonego), podjednostka . znaczona GFP jest zatrzymana w błonie. Kolor żółty wskazuje nakładanie się czerwonego i zielonego sygnału. Paski skali wskazują 5 .m. Panel B pokazuje znaczenie zmniejszenia kolokalizacji. Barwienie podjednostki a widoczne w komórkach eksprymujących wektor kontrolny dla fuzji CATGFP jest nieswoiste; był on jednak ograniczony do cytoplazmy, podczas gdy podjednostka . klonów fuzyjnych ADGRE2GFP znajdowała się głównie w błonie plazmatycznej. Dlatego, barwienie podjednostki a cytoplazmatycznej zostało zamaskowane do analizy kolokalizacji (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku). Każdy punkt danych jest współczynnikiem Pearsona, mierzącym korelację między położeniem a intensywnością podjednostek . i ., w kolokalizowanej objętości stosu obrazów o dużej mocy pola przez głębokość komórek
[patrz też: Azeloglicyna, wagi apteczne, hologramy els ]
[przypisy: odleżyny profilaktyka, dyżur aptek polkowice, centrum onkologii bydgoszcz oddziały ]

Powiązane tematy z artykułem: centrum onkologii bydgoszcz oddziały dyżur aptek polkowice odleżyny profilaktyka