Skip to content

Receptor A2 fosfolipazy typu M jako docelowy antygen w idiopatycznej nefropatii błoniastej czesc 4

3 tygodnie ago

511 words

W przeciwieństwie do tego, surowica od 30 zdrowych kontrolnych, 15 pacjentów z białkomoczem innych niż błoniasta nefropatia (nefropatia cukrzycowa lub ogniskowa i segmentowa stwardnienie kłębuszków nerkowych) i 7 pacjentów z innymi zaburzeniami autoimmunologicznymi nie reagowało z tym antygenem, gdy testowano je w identycznych warunkach (Figura 1, i Tabela w Dodatku Uzupełniającym). Ponadto, żadna z próbek surowicy od ośmiu pacjentów z nefropatią błoniastą wtórną (sześć z nefropatią błoniastą tocznia i dwiema z nefropatią błoniastą związaną z zapaleniem wątroby B) były reaktywne z antygenem 185 kD (Figura 1B). Analiza chi-kwadrat wskazała na wyjątkowo niskie prawdopodobieństwo takiego rozkładu wynikającego z przypadku (P = 2 × 10-12 dla całej serii, P = 0,004 dla wtórnej vs idiopatycznej błoniastej nefropatii). Traktowanie peptydem N-glikozydaza F spowodowało znaczne przesunięcie w ruchu tego antygenu do około 145 kD, wskazując, że jest silnie glikozylowane. Wszystkie próbki surowicy, które początkowo reagowały z natywnym pasmem 185 kD, rozpoznawały także mniejsze, deglikozylowane pasmo (Figura 1A). Figura 2. Figura 2. Identyfikacja antygenu 185 kD w kłębuszkach ludzkich. Panel A pokazuje wyniki Western blotting próbek ludzkiego ekstraktu kłębuszkowego (HGE) i rekombinowanego receptora fosfolipazy A2 (rPLA2R), deglikozylowane peptydem N-glikozydaza F (PNGaza F +) lub nie deglikozylowane (PNGaza F-), z reaktywnym próbkę surowicy od pacjenta z nefropatią błoniastą (MN) lub przeciwciałem poliklonalnym wzbudzonym przeciwko receptorowi A2 fosfolipazy typu M (PLA2R). Rekombinowane białko migrowało do nieco niższej pozycji niż natywne białko kłębuszkowe, chociaż deglikozylacja za pomocą peptydu N-glikozydazy F powodowała migrację zarówno rekombinowanych, jak i natywnych izoform do tej samej pozycji. Panel B pokazuje, że immunoprecypitacja natywnego PLA2R występowała w reaktywnej próbce surowicy od każdego z pięciu pacjentów z błoniastą nefropatią (MN1, MN2, MN3, MN6 i MN7), ale nie w próbce niereaktywnej (MN8), a nie w niereaktywnych próbkach surowicy z normalne kontrole (NC1 i NC2) lub w przypadku braku surowicy. Immunoprecypitaty następnie poddano elektroforezie w warunkach redukujących i poddano analizie Western blot z przeciwciałami przeciwko PLA2R (u góry) lub przeciwko ludzkiej IgG (na dole). W reaktywnych próbkach od wszystkich pięciu pacjentów z błoniastą nefropatią, PLA2R był immunoprecypitowany z ludzkiego ekstraktu kłębuszkowego, podczas gdy nie było immunoprecypitacji w niereaktywnych próbkach od jednego pacjenta i od kontroli. Nie wykryto PLA2R, gdy ludzka surowica została pominięta w reakcji. Dolny obraz pokazuje, że immunoprecypitaty próbek od kontroli i pacjentów z błoniastą nefropatią zawierały co najmniej równoważne ilości IgG.
Zarówno natywne, jak i N-deglikozylowane postacie antygenu mogą być związane i zasadniczo wzbogacone przez absorpcję przez aglutyninę z kiełków pszenicy (dane nie pokazane). Wiązanie deglikozylowanej postaci może odzwierciedlać obecność resztkowych N-połączonych węglowodanów, które są niedostępne dla peptydu N-glikozydazy F w warunkach nieredukujących. Natywne i deglikozylowane białka kłębuszkowe eluowano z aglutyniny kiełków pszenicy i rozdzielono za pomocą elektroforezy żelowej
[przypisy: mezoterapia igłowa, Upadłość transgraniczna, olej kokosowy na włosy ]

Powiązane tematy z artykułem: mezoterapia igłowa olej kokosowy na włosy Upadłość transgraniczna