Skip to content

Receptor A2 fosfolipazy typu M jako docelowy antygen w idiopatycznej nefropatii błoniastej ad 8

3 tygodnie ago

519 words

Panele D, E i F są powiększonymi obrazami pudełkowych obszarów odpowiednio w panelach A, B i C. Gwiazdki w panelu F wskazują kapilarę. Przeciwciało anty-PLA2R było blokowane rekombinowanym fragmentem (Panel G), z barwieniem praktycznie wyeliminowanym, pomimo ciągłej obecności IgG4 (Panel H). Panel I jest konfokalnym obrazem reprezentatywnych kłębuszkowych pętli kapilarnych w próbce biopsyjnej od pacjenta z nefropatią błoniastą tocznia; PLA2R i IgG4 nie są kolokalizowane. IgG4 wykrywano owczym przeciwciałem anty-ludzkim IgG4 (rozcieńczenie 1: 500) i króliczym przeciwciałem przeciw owczym IgG (rozcieńczenie 1: 500). IgG eluowano z rdzeni biopsyjnych od pacjentów z błoniastą nefropatią (MN), nefropatią błoniastą tocznia (LMN) lub nefropatią IgA (IgAN). To wymyte IgG zastosowano do immunoblotu ludzkiego ekstraktu kłębuszkowego (HGE) lub rekombinowanego PLA2R (rPLA2R) (panel J). Jedynie IgG eluowane z próbek MN zidentyfikowało natywny i rekombinowany PLA2R. Panel K pokazuje, że IgG eluowane z próbki biopsji MN3 rozpoznawało tylko te prążki odpowiadające PLA2R. Eksperymentalne modele nefropatii błoniastej wykazały zakrywanie i zrzucanie megaliny z powierzchni podocytów oraz gromadzenie się kompleksów przeciwciał megalina-antymegalina w podnabłonkowych warstwach odpornościowych. Na podstawie tych danych poszukiwaliśmy dowodów na kolokalizację PLA2R i IgG w złogach kłębuszkowych u pacjentów z błoniastą nefropatią. Jak pokazano za pomocą konfokalnej analizy kriosekcji próbek pobranych z biopsji nerki od pacjentów z błoniastą nefropatią (Figura 5A do 5F, z próbkami kontrolnymi pokazanymi na Fig. 6 i 7 w Dodatku Uzupełniającym), PLA2R jest obecny i kolokalizuje z IgG4 w drobnym ziarnie wzór typowy dla nefropatii błoniastej. Podobnie jak w normalnej nerce, wybarwienie PLA2R może być zablokowane przez rekombinowany fragment PLA2R (Figura 5G). Chociaż intensywność barwienia była różna w próbkach od ośmiu pacjentów z błoniastą nefropatią, wszystkie ujawniły taki sam ziarnisty wzór PLA2R (dane nie pokazane). Przeciwnie, PLA2R i IgG4 nie kolokalizowały w próbce biopsyjnej od pacjenta z nefropatią błoniastą toczeń, badaną w identycznych warunkach (Figura 5I).
Aby potwierdzić, że IgG w kłębuszkach od pacjentów z błonową nefropatią było reaktywne wobec PLA2R, wymywaliśmy IgG z próbek biopsyjnych i stosowaliśmy je w analizie Western z natywnym i rekombinowanym PLA2R. IgG z powodzeniem eluowano z czterech próbek biopsyjnych od pacjentów z idiopatyczną błoniastą nefropatią, jedną od pacjentów z nefropatią błoniastą tocznia, a dwie od pacjentów z nefropatią IgA (ryc. 8 w dodatku uzupełniającym). IgG eluowane z próbek od pacjentów z idiopatyczną błoniastą nefropatią specyficznie wykrywały odpowiednio określone prążki PLA2R w ludzkim ekstrakcie kłębuszkowym iw lizatach komórkowych, które były pozytywne dla rekombinowanego PLA2R, podczas gdy IgG eluowało z trzech innych próbek od pacjentów z immunologicznym kompleksem kłębuszkowym. choroba nie (rys. 5J i 5K).
Stowarzyszenie z aktywnością choroby
Figura 6. Figura 6. Przeciwciało wobec receptora fosfolipazy A2 typu M (PLA2R) i aktywności choroby u pacjenta z nefropatią błoniastą
[patrz też: srebro lokacyjne, olejek arganowy do włosów, obróbka strumieniowo ścierna ]

Powiązane tematy z artykułem: obróbka strumieniowo ścierna olejek arganowy do włosów srebro lokacyjne