Skip to content

Receptor A2 fosfolipazy typu M jako docelowy antygen w idiopatycznej nefropatii błoniastej ad 6

2 miesiące ago

527 words

Groty wskazują w pełni glikozylowany natywny PLA2R. Przeważającą podklasą IgG, która reagowała z natywnym antygenem była IgG4, z różną ilością reaktywności obserwowanej dla IgG1, IgG2 i IgG3. Identyczne wyniki uzyskano przy użyciu rekombinowanego PLA2R zamiast HGE (nie pokazano). Żadna z dodatnich próbek surowicy nie zachowała reaktywności względem białka o masie cząsteczkowej 185 kDa, gdy ekstrakt kłębuszkowy poddano elektroforezie w warunkach redukujących (Figura 3A i dane nie pokazane). Ponadto, rekombinowany PLA2R i natywne białko kłębuszkowe mają ten sam epitop wrażliwy na redukcję (Figura 3A). Zarówno monospecyficzne przeciwciała anty-PLA2R, jak i próbki surowicy od pacjentów z błonową nefropatią, silnie wykryły nieredukowaną rekombinowaną i natywną kłębuszkową PLA2R. W warunkach redukujących przeciwciała poliklonalne nadal wykrywały zarówno rekombinowany, jak i natywny PLA2R (choć rzadziej), ale próbki surowicy od pacjentów z błonową nefropatią nie były. Sugeruje to, że autoprzeciwciała u pacjentów z błoniastą nefropatią jednoznacznie rozpoznają epitop zależny od konformacji w natywnym i rekombinowanym antygenie.
Profil immunoglobulin u pacjentów z nefropatią błoniastą jest charakterystyczny dla odpowiedzi limfocytów T pomocniczych typu 2, z kłębuszkowymi odczynnikami immunologicznymi zawierającymi głównie przeciwciała z podklasą IgG4.16,17 Podobnie, próbki surowicy od pacjentów z błoniastą nefropatią są wysoce wzbogacone w autoprzeciwciała IgG4. reagujące z rekombinowanym PLA2R lub natywnym białkiem w ekstrakcie kłębuszkowym. Chociaż IgG4 jest dominującą podklasą przeciwciał anty-PLA2R IgG, inne podklasy występują również w mniejszych ilościach (Figura 3B).
Lokalizacja kłębuszków PLA2R
Figura 4. Figura 4. Ekspresja receptora fosfolipazy A2 typu M (PLA2R) w tkance normalnej nerki i kłębuszkach nerkowych. Seryjne kriosekacje kory normalnych ludzkich nerek zostały wybarwione immunologicznie przeciwciałem anty-PLA2R (rozcieńczenie 1: 150), a następnie skoniugowane z Cy3 przeciwciało IgG przeciwko śwince morskiej (rozcieńczenie 1: 500). Panel A pokazuje dwa wyraźnie zabarwione kłębuszki (groty strzałek) i rozproszone wybarwienie rurkowe (strzałka). Panel B pokazuje sąsiednią sekcję, w której przeciwciało anty-PLA2R było wstępnie zaabsorbowane rekombinowanym fragmentem PLA2R zawierającym domeny lektynopodobne typu C (CTLD) 4, 5 i 6 (Panel H). Kłębkowe wybarwienie PLA2R jest całkowicie zablokowane przez rekombinowany fragment (groty strzałek), podczas gdy rozproszone wybarwienie rurkowe (strzałka) nie jest zablokowane, a zatem jest niespecyficzne. Panel C pokazuje próbkę ludzkiej nerki traktowaną surowicą nieimmunologiczną świnki morskiej (rozcieńczenie 1: 200), a następnie skoniugowane z Cy3 przeciwciało IgG przeciw śwince morskiej i barwione Hoechst 33342 (barwnik jądrowy); wstawka pokazuje odsłonięty kłębek nerkowy zamiast przeciwciała anty-PLA2R (rozcieńczenie 1: 200), ale poza tym ocenia się w identycznych warunkach. Następnie kriosekacje normalnej ludzkiej kory nerkowej poddawano kosztowi przeciwciał przeciwagregacyjnych, a następnie przeciwciało drugorzędowe skoniugowane z Alexa Fluor 488, w celu znakowania błony podstawnej kłębuszkowej (panele D i E); ponadto, barwienie PLA2R przeciw śwince morskiej przeciw PLA2R zostało albo odblokowane (panel D) albo zostało zablokowane (panel E), jak opisano powyżej
[hasła pokrewne: Azeloglicyna, stomatolog opole, olejek arganowy ]

Powiązane tematy z artykułem: Azeloglicyna olejek arganowy stomatolog opole