Skip to content

Izolowany hipogonadyzm rodzinny hiponitotropowy i mutacja GNRH1 czesc 4

3 tygodnie ago

300 words

Konstrukty ekspresyjne GnRH1 o pustych wektorach, typu dzikiego i zmutowanych transfekowano do komórek AtT20 mysiego nowotworu przysadki.24 GnRH mierzono w supernatancie testem radioimmunologicznym, jak opisano poprzednio. Wyniki
Homozygotyczna mutacja GNRH1
Rysunek 2. Rysunek 2. Charakterystyka molekularna i konsekwencje funkcjonalne mutacji GNRH1 w ok. 18-19. Panel A pokazuje wyniki automatycznego sekwencjonowania DNA GNRH1, obejmujące mutację przesunięcia ramki odczytu, dla trzech członków rodziny indeksu. Wstawienie adeniny w pozycji c.18-19 jest oznaczone strzałką. Ta mutacja zmiany ramienia była homozygotyczna u chorego członka rodziny męskiej (przedmiot II-1, z wynikami tutaj pokazanymi) oraz u jego chorej siostry (przedmiot II-4); heterozygotyczny w Podmiocie I-1 (z wynikami tutaj pokazanymi), Temat I-2 i Temat II-3; i nieobecny w Temacie II-2 (z wynikami tutaj pokazanymi). Aminokwasy w ramce są wskazane powyżej każdej sekwencji. Panel B pokazuje sekwencje peptydów normalnego prepropeptydowego hormonu uwalniającego gonadotropiny (GnRH) (92 aminokwasy) i zmutowanego przypuszczalnego peptydu (42 aminokwasy). Aminokwasy są reprezentowane przez litery z międzynarodowej nomenklatury. W prepeptydzie GnRH, funkcjonalne domeny są przedstawione dla peptydu sygnałowego (23 aminokwasów, pokazane na niebiesko), dekapeptydu GnRH (pokazanego na fioletowo) i peptydu związanego z GnRH (GAP) (56 aminokwasów, które są obcięte na figurze). , pokazane na zielono). W sygnale peptydowym hydrofobowe leucyny, niezbędne do kierowania peptydu do retikulum endoplazmatycznego, pokazano na czerwono. W zmutowanym peptydzie sześć konserwatywnych N-końcowych aminokwasów zaznaczono na niebiesko, a nienormalna sekwencja aminokwasowa bez sekwencji GnRH i GAP (36 aminokwasów) wskazano na różowo. Panel C pokazuje wykrywanie GnRH w kondycjonowanej pożywce hodowlanej po ekspozycji na transfekowane komórki AtT-20. Kotransfekcja plazmidem pEGFP-N1 nie ujawniła żadnej różnicy w ogólnej wydajności transfekcji. GnRH mierzono w teście radioimmunologicznym 48 godzin po transfekcji. Wyniki przedstawiono jako średnie (. SE) z trzech niezależnych eksperymentów przeprowadzonych w trzech powtórzeniach. Przeprowadzono jednostronną analizę wariancji, a następnie procedurę wielokrotnego porównania Tukeya. Gwiazdka oznacza P <0,05 dla porównania plazmidu transfekowanego GNRH1 typu dzikiego i zmutowanego.
W GNRHR1, GPR54, KISS1, FGFR1 i GNRH2, eksony genów i granice intron-egzon u chorego członka rodziny męskiej (przedmiot II-1) były identyczne z sekwencjami referencyjnymi. W tym przedmiocie i jego dotkniętej siostrze (Temat II-4), sekwencjonowanie sekwencji kodującej GNRH1 ujawniło homozygotyczną insercję adeniny w pozycji nukleotydowej 18 (mutacja c.18-19insA), powodując przesunięcie ramki (Figura 2A). Ten translowany defekt doprowadziłby do powstania nieprawidłowego peptydu rozpoczynającego się od aminokwasu 7. Ten nieprawidłowy peptyd ze skróconą sekwencją sygnałową peptydu pozbawioną hydrofobowego rdzenia nie ma prawidłowej sekwencji dekapeptydu GnRH i ma całkowitą długość 42 aminokwasów zamiast 92 aminokwasów. kwasy normalnego peptydu prepro-GnRH (Figura 2B).
Oboje rodzice byli heterozygotyczni pod względem mutacji, podobnie jak nienaruszona siostra. Brat nie dotknięty chorobą nie miał mutacji
[patrz też: mezoterapia, olej kokosowy na włosy, srebro lokacyjne ]

Powiązane tematy z artykułem: mezoterapia olej kokosowy na włosy srebro lokacyjne